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淀粉酶ELISA試劑盒
淀粉酶ELISA試劑盒
美國DRG*,貨號EIA4460
美國DRG中國*代理商“深圳科潤達(dá)生物工程有限公司”竭誠為您服務(wù)
 
 
預(yù)期用途
此酶免試劑盒可檢測人血清和尿液中的胰淀粉酶
僅供研究使用,不能用于診斷
實驗原理
此酶免試劑盒依據(jù)的是夾心法原理。包被孔內(nèi)包被有抗人胰淀粉酶抗體,樣品與酶聯(lián)物在包被孔內(nèi)孵育,未結(jié)合的酶聯(lián)物被洗去,樣品中的人胰淀粉酶濃度與結(jié)合的酶聯(lián)物量成正比,加入底物液后,樣品中的人胰淀粉酶濃度與顏色的強度成正比
注意事項
1.       此試劑盒僅用于研究,不能用于診斷
2.       不同批次的試劑盒成分不能混合使用
貯存和穩(wěn)定性
1.       試劑盒裝在含有干燥劑的密封袋內(nèi),貯存于2-8℃冰箱內(nèi)
2.       未打開的試劑盒可保存至有效期
3.       TMB底物液帶有微弱的顏色,如變藍(lán),則應(yīng)丟棄。貯存或使用期間不要將試劑暴露于強光下。
試劑盒組成
1.       微孔板,96T,包被有抗人胰淀粉酶抗體
2.       樣品稀釋液,11ml,1瓶
3.       酶聯(lián)物,11ml,HRP標(biāo)記的抗人胰淀粉酶抗體
4.       參考標(biāo)準(zhǔn)品0.3ml/支,濃度為:10,50,150,300,600U/L
5.       質(zhì)控品,0.3ml,參考值見瓶身
6.       TMB底物液,11ml,含過氧化氫和TMB的緩沖液
7.       洗滌緩沖液,100X,10ml,工作洗滌液的配制:10ml洗滌液+990ml去離子水
8.       終止液,2N HCL
9.       板架
實驗所需材料但試劑盒未提供
1.       酶標(biāo)儀
2.       移液器,體積“10,50,100ul
3.       1L洗滌緩沖液
樣品采集與處理
靜脈穿刺采集全血,允許凝集,室溫下通過離心分離出血清,貯存于無菌試管內(nèi)
如果血清不立即使用,則可保存于2-8℃下1個月,或是在-20℃凍存6個月。避免反復(fù)凍融
實驗準(zhǔn)備
1.       實驗前,將所有試劑平衡至室溫,輕輕振蕩
2.       準(zhǔn)備好實驗所需的所有試劑,一旦實驗開始,就不能中斷
3.       每個樣品都使用新槍頭吸取
實驗步驟
1.       將實驗所需的板條固定好
2.       加10ul的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品于相應(yīng)的孔內(nèi)
3.       每孔加入100ul的酶聯(lián)物
4.       室溫下孵育60min
5.       洗滌液洗板5次(300ul/孔)
6.       每孔加入100ul的TMB底物液,包括blank 孔
7.       室溫下孵育30min
8.       每孔加50ul終止液終止反應(yīng),然后在酶標(biāo)儀450nm處讀數(shù)
結(jié)果計算
1.       以參考標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸,吸收值為Y軸,在坐標(biāo)紙上繪制曲線
2.       從標(biāo)準(zhǔn)曲線上可得到樣品中胰淀粉酶的值
標(biāo)準(zhǔn)曲線經(jīng)典例子
 
 
 
 
 
附:采用全自動酶標(biāo)儀檢測,只需檢測前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù),如坐標(biāo)參數(shù)(線性,半對數(shù))和計算方式參數(shù)(三次回歸、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程),可直接得出結(jié)果
 
本譯文僅供參考,詳情請以原文為準(zhǔn)。
 
 
 
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